本文標(biāo)題："宿主細(xì)胞培養(yǎng)物或生物研究圖像顯微鏡"
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宿主細(xì)胞培養(yǎng)物或生物研究圖像顯微鏡
蛋白質(zhì)純化的特定要求變化很大，工業(yè)上用的許多酶其實并不很純
，但是，只要它們能夠勝任工作，也就足夠了。“加工”用酶(如
口一淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶)被成噸地生產(chǎn)，主要以細(xì)菌培養(yǎng)物
分泌產(chǎn)物的形式來生產(chǎn)。為了盡可能地降低成本，這些酶只經(jīng)過了
有限的純化工藝。而在另一種極端情況下，用于研究和分析的酶產(chǎn)
品則需要進行高度的純化，以保證污染物的活性不會干擾酶的目的
用途，任何熟悉分子生物學(xué)用酶的人都知道，微量的DNA酶或RNA酶
污染可能會造成精心設(shè)計的實驗全盤皆輸。
蛋白質(zhì)純化所用的大多數(shù)方法都是在那個時期建立的，至少其原
理是在那時建立的。較近代的進展主要是儀器裝備方面，用來優(yōu)化
每種方法學(xué)的應(yīng)用。分子生物學(xué)的快速發(fā)展刺激了儀器裝備的進展
，因為基因產(chǎn)物的分離通常要早于基因的分離。一方面由于使用微
量的蛋白質(zhì)就足以對這些產(chǎn)物進行定性分析(如部分測序)，所以對
大規(guī)模甚至中等規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)方法的需求下降，這樣，設(shè)計專門
用于處理毫克至微克范圍蛋白質(zhì)量的現(xiàn)代設(shè)備得到了極速的發(fā)展；
而另一方面，使用X射線晶體學(xué)和核磁共振(NMR)的結(jié)構(gòu)研究需要幾
百克的純蛋白質(zhì)，因此在實驗室研究中仍然需要大規(guī)模的設(shè)備和方
法。
所研究的蛋白質(zhì)性質(zhì)也發(fā)生了很大的變化，盡管酶曾經(jīng)是最熱
的研究對象，但現(xiàn)在已被一些非酶類的蛋白質(zhì)(如生長因子、激素
受體、病毒抗原和膜轉(zhuǎn)運蛋白)所超越。在這些蛋白質(zhì)中，有許多
在天然材料中的含量極微，其純化會成為一項主要的工作。在過去
曾進行了巨大的努力，使用了千克量的起始原料(如人體器官)，而
最后只得到了幾微克的純產(chǎn)物。而現(xiàn)在更通常的做法是使用遺傳學(xué)
的方法：在蛋白質(zhì)被純化之前甚至在被正確鑒定之前克隆基因，然
后在適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞培養(yǎng)物或生物中表達(dá)，表達(dá)水平會比原始材料
高幾個數(shù)量級，這樣會使得純化工作相對簡單。預(yù)先知道一些蛋白
質(zhì)的物理特性會很有用，有助于建立適當(dāng)?shù)募兓桨福瑥闹亟M材料
中純化蛋白質(zhì)。從另一方面講，現(xiàn)在制備融合蛋白的方法很多，可
通過親和技術(shù)進行純化，而不必知道目的蛋白的任何性質(zhì)，而且也
有方法對表達(dá)產(chǎn)物進行修飾，以進一步簡化純化步驟。
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