本文標(biāo)題："蛋白質(zhì)的碘化作用與大的蛋白質(zhì)分子的順序測定"
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蛋白質(zhì)的碘化作用與大的蛋白質(zhì)分子的順序測定
大的蛋白質(zhì)分子的順序測定會(huì)提出許多問題，但其測定方法基本
上是與測定這個(gè)十肽的方法一樣的。將蛋白質(zhì)先用胰蛋白酶和胰凝乳蛋
白酶分裂成較小的、容易確定的肽。然后利用某些取決于肽的電荷豹技
術(shù)將這些肽分離。這類技術(shù)包括電泳，在電泳時(shí)帶電荷的樣品在電場中
移動(dòng)，移動(dòng)速度取決于分子的電荷和大小；還有離子交換層析法，該法
是依靠在不同情況下，樣品與帶有電荷的離子交換樹脂結(jié)合力的不同來
分離肽。然后找出各肽的詳細(xì)順序。采取利用兩種酶提供的“重疊法”
，就可以弄清楚蛋白質(zhì)的一級順序。某些試劑可用來測定很大的蛋白質(zhì)
的結(jié)構(gòu)，這些試劑可在一定的氨基酸殘基處專一性地切斷鍵，如溴化氰
可以在甲硫氨酸殘基之后的地方切斷。蛋白質(zhì)通過這種斷裂首先變成比
較容易處理的肽。含有數(shù)百個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)都可以用這種方法
搞清楚。
同樣，如果酪氨酸是活性中心的殘基，那么蛋白質(zhì)的碘化作用就可
以引起活力的喪失，可用FDNB處理來證明活性中心的賴氨酸、組氨酸和
酪氨酸殘基。這些方法沒有一個(gè)是對鑒定活性中心殘基絕對專一和具有
結(jié)論性的。不過將各種方法結(jié)合使用，再參考從動(dòng)力學(xué)研究得到的證據(jù)
，很多酶的活性中心的性質(zhì)是可以測定出來的。
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